Banca de DEFESA: DARLINE BALIEIRO DOS SANTOS

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: DARLINE BALIEIRO DOS SANTOS
DATA: 23/09/2023
HORA: 14:10
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Avaliação da atividade anti-leishmania in vitro de nanoemulsões obtidas da oleorresina de sucupira-branca (Pterodon emarginatus vogel)

PALAVRAS-CHAVES:

Doenças negligenciadas. Leishmaniose. Pterodon emarginatus V.. Nanoemulsão. Oleorresina. Anti-leishmania.

PÁGINAS: 87
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
SUBÁREA: Farmacognosia
RESUMO:

Introdução: A Leishmaniose é uma das doenças infectoparasitárias incluída pela Organização Mundial da Saúde (OMS) entre as seis mais importantes. É causada por parasitos protozoários do gênero Leishmania onde a transmissão ocorre pelo repasto sanguíneo de fêmeas de flebotomíneos infectadas, levando a manifestações na forma cutânea, mucocutânea ou visceral. A variante Leishmaniose cutânea (LC) possui patogenicidade elevada, com lesões localizadas que podem evoluir para lesões crônicas. O tratamento é restrito a um pequeno número de medicamentos que exibem efeitos tóxicos, eficácia limitada, além de relatos de resistência aos mesmos. Tal fato justifica a procura de inovações e estratégias terapêuticas, notadamente partindo de compostos de produtos naturais bioativos, usados na medicina tradicional. Uma espécie vegetal conhecida por suas propriedades terapêuticas é a Pterodon emarginatus. No entanto, a baixa solubilidade intrínseca em água dos derivados vegetais da espécie, incluindo a oleoresina extraída dos seus frutos, dificulta a disponibilidade destes compostos bioativos. Uma alternativa para melhorar a sua solubilidade em água, otimizar sua estabilidade e permitir aplicações clínicas é o encapsulamento dos seus derivados como por exemplo com o desenvolvimento de nanoemulsões (NE). Objetivo: Preparar uma nanoemulsão da oleorresina dos frutos sucupira-branca (OS) (Pterodon emarginatus Vogel) e avaliar, in vitro, a ação anti-leishmania do produto. Material e Métodos: Obtido a OS por prensagem a frio, foram preparadas nanoemulsões a 2,5% (p/p), por 3 métodos diferentes, que foram caracterizadas por diâmetro hidrodinâmico médio, distribuição do tamanho e índice de polidispersão (IP) das partículas, técnica de espalhamento dinâmico da luz (DLS), associado ao potencial zeta (PZ), com análise morfológica por crio-microscopia de transmissão eletrônica (Cryo-TEM) e análise de nanopartículas (NTA), sendo eleita a que apresentou melhores parâmetros de estabilidade em tempos programados (0, 1, 7, 14, 30 dias) e observados os aspectos físicos para os ensaios in vitro de viabilidade. Avaliou-se a atividade leishmanicida frente à espécie Leishmania amazonensis com uso dos parasitos promastigotas em fase estacionária. Testando-se nas células de linhagem J774A.1, com determinação do parasitismo, prévia análise colorimétrica por metil tetrazólio (MTT) da viabilidade de amastigotas in vitro e sua concentração inibitória resultante, seguido da quantificação de óxido nítrico (NO), interleucinas (IL-10) e Fator de necrose tumoral (TNF). Fez-se também o estudo de similaridade por ancoragem dos compostos da OS de potencial leishmanicida para atividade ligante a enzima alvo Pteridina redutase1. Os ensaios foram feitos em triplicatas, descritos por programa GraphPad Prism 6,0 análise de Regressão linear e uso do Teste ANOVA. Resultados e discussão: percentuais significativos para β-cariofileno foram caracterizados no óleo por Cromatografia Gasosa associada à espectometria de massa (CG-MS). A NE-OS obtida por método de alta energia, eleita por parâmetros em função de interação eletrostática e dispersão coloidal, apresentou IP<0,2, PZ -20,7 ± 0,8, pH 5,9 ± 0,1, evidenciando formulações monodispersas e boa estabilidade das gotículas (DLS 77,6 ± 2,9 nm e NTA 95,9 ± 14,2 nm, concentração/mL de partículas 2.67x1012 ± 2.69 x1011), sem modificação física durante os 30 dias armazenadas sob variação de temperatura (8°C e 25°C). As células viáveis por MTT dos MΦs J774A.1 tratados com a NE-OS foi igual e/ou superior que 75% (62.25 μg/mL), com CC50 (Concentração Citotóxica 50%) de 125,6
μg/mL, IC50 33,45 μg/mL considerada ativa, apresentando índice de seletividade (IS) 3,75 μg/mL. A NE-OS mostrou reduzir os protozoários in vitro progressivo às doses/concentração estabelecidas (31,25μg/mL à 500μg/mL), com expressivo aumento das funções efetoras NO, e equilíbrio interleucinas pró-inflamatória (TNF), após 48h de tratamento. Considerações Finais: Foi demonstrada a eficácia da NE-OS por células tratadas quanto sua capacidade antileishmania. Paralelamente, a docagem molecular dos compostos da OS por possível inibidor da PTR1, apresentou resultados de afinidade entre predições, o que sustenta e viabiliza estudos futuros associados a possíveis fármacos derivados da nanoemulsão de sucupira.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 2988948 - ANNA ELIZA MACIEL DE FARIA MOTA OLIVEIRA
Externo à Instituição - DIEGO DOS SANTOS FERREIRA - UFMG
Externo ao Programa - 1031791 - HELISON DE OLIVEIRA CARVALHO